在眾多的生物實驗室,分子生物學檢測方法如pcr因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度極高,極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性,所以對環(huán)境污染的控制也極為嚴格。如何解決pcr實驗室檢測被污染的問題呢?下面廣州華創(chuàng)工程pcr實驗室裝修公司的小編給大家詳細的分析分析一下。
pcr反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質粒污染、pcr擴增產物污染。
還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質點分散并懸浮在氣體介質中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦時,比如在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染。這樣的污染來的悄無聲息,防不勝防。
解決pcr實驗室被污染的方法
1、酒精擦拭:核酸沉淀,擦拭后確保污染表面污染得到一定程度的緩解(簡單、方便、低成本)。
2.修飾:標記遺傳物質,防止聚合酶與核酸的結合,抑制dna擴散(效果比較好)。
3.酶解:酶可將長鏈核酸分子降解成小片段(速度快,效果相對較好)。
4.高壓變性:高壓可將核酸降解為20-30bp小片段(徹底,成本低)。
5.紫外照射:pcr二聚體在產品中形成,延伸終止(方便、范圍廣、成本低)。
在有實驗室的地方,實驗室污染是不可避免的。實驗室污染不僅會影響實驗和科研的質量和效果,還會損害實驗室工作人員的健康。pcr實驗室應始終注意污染監(jiān)測,考慮是否有污染,以采取措施防止和消除污染。
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